內(nèi)質(zhì)網(wǎng)α-甘露糖苷酶1抗體抗體分子標記技術(shù)

內(nèi)質(zhì)網(wǎng)α-甘露糖苷酶1抗體抗體分子標記技術(shù)：

（一）原理

當應用化學氧化法時(NaI)遇強氧化劑,離子被氧化為分子,所生成的自由分子可與某些基團進行鹵化反應。蛋白質(zhì)分子可進行鹵化反應的基團主要為殘基,殘基也可能進行化。在應用胺T( Chloramine T)法的實驗中,所用的氧化劑(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)強揮發(fā)性的有機溶劑中。該溶劑加入試管后,先讓其揮發(fā)(即讓氧化劑將試管包被),然后把Na125I和蛋白質(zhì)液加入包被好的試管中,反應完成即將混合液移入他管終止反應。

（二）準備

1.試劑

經(jīng)親和層析純化的多克隆抗體或單克隆抗體；0.5mol/L磷酸鈉緩沖液,pH7.5；無載體的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液；100g/L三醋酸；70%乙醇；新鮮制備的含2mg/m1絡胺T的0.5mol/L磷酸鈉緩沖液(pH7.5）；胺T反應終止緩沖液；

（三）操作要點

1.用胺T法進行化,也可在大約pH7.0的緩沖液中進行；

2.如果氧化反應損傷蛋白質(zhì)，可將抗體與異硫酸熒光素(FITC)偶聯(lián))胺T量減少到0.02mg/m，并將偏重亞硫酸液的濃度降到0.024mg/ml；

3. Iodogen-包被的試管可在干燥器中,于室溫下保存多年；

4.1251標記的抗體,在制備后六周內(nèi)均可使用(1251的半衰期為59.6天）；

5.要注意保證所用的Na1251是新鮮的,陳舊制劑的比活性低；

6.碘化偶爾會對抗原的抗體結(jié)合位點有干擾,因此降低其結(jié)合能力,但這種情況很少見。

phospho-ASK1 (Ser966)磷酸化細胞凋亡信號調(diào)節(jié)激酶1抗體

phospho-ATXN1 (Ser775)磷酸化失調(diào)癥蛋白1抗體

ATXN1/Ataxin-1脊髓小腦失調(diào)癥蛋白1抗體

phospho-Amyloid Precursor Protein (Thr668)磷酸化APP淀粉樣肽前體蛋白抗體

phospho-ASK1 (Ser967)磷酸化細胞凋亡信號調(diào)節(jié)激酶1抗體

phospho-ASK1 (Thr845)磷酸化細胞凋亡信號調(diào)節(jié)激酶1抗體

phospho-ATF2 (Thr69/71)磷酸化活化復制因子2抗體

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Acetyl CoA Carboxylase乙酰輔酶A羧化酶抗體

Phospho-Acetyl Coenzyme A carboxylase alpha (Ser78)磷酸化乙酰輔酶A羧化酶抗體

Phospho-Ack1 (Tyr859 + 860)磷酸化Ack1抗體

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phospho-AMPK beta 1 (Ser108)磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶β1抗體

phospho-ALK (Tyr1604)磷酸化間變型淋巴瘤激酶抗體

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phospho-ATP citrate lyase (Ser455)磷酸化三磷酸腺檸檬酸裂解酶抗體

phospho-ATR (Ser428)磷酸化ATR抗體

AMN1細胞核重定位及紡錘體檢查點蛋白AMN1抗體

ALG11天門冬酰胺連接糖基化11抗體

ASF1A細胞衰老相關(guān)蛋白ASF1A抗體

AGPHD1氨基糖苷類磷酸結(jié)構(gòu)域蛋白抗體